<<
>>

2.2.5 Регистрация спектров поглощения: спектрофотометры и протокол измерения

Регистрацию спектров поглощения образцов, оптически пустых растворов, осуществляли на спектрофотометрах исследовательского класса: Shimadzu- 2401(PC) с одинарным монохроматором и Shimadzu-2550(PC) с двойным монохроматором (Shimadzu, Япония), построенных по классической двулучевой оптической схеме (Conventional Model).

Величина рассеянного света для Shimadzu-2401(PC) составляет менее 0,015 % при длинах волн 220 и 340 нм, Shimadzu-2550(PC) — менее чем 0,0003 %. По другим спектрофотометрическим характеристикам приборы идентичны.

Измерения поглощения образцов проводили в кварцевой кювете QS Hellma (Hellma) с длиной оптического пути 1 см в диапазонах длин волн 230-650 нм, со спектральной шириной щели 0,5 нм, шагом сканирования 0,5 (Shimadzu- 2401(PC)) и 0,2 нм (Shimadzu-2550(PC)). Скорость сканирования соответствовала режиму Slow.

Управление спектрофотометрами и предварительную обработку данных выполняли с помощью ПО UVProbe (Shimadzu).

Самотестирование и калибровка спектрофотометров Shimadzu по точности установки длины волны осуществлялись автоматически всякий раз во время инициализации устройства.

В качестве эталонных значений длин волн спектрофотометрами использованы характерные пики интенсивности излучения (486,0 и 656,1 нм) штатно установленной дейтериевой лампы, которая является также источником УФ-света при регистрации спектров.

Спектрофотометры проходили тест, если после рекалибровки значения первого пика находились в диапазоне 485,7-486,3 нм, второго — 655,8-656,4 нм. Однако фактические значения для этих длин волн по отношению к эталонным (при контрольных измерениях), отличались менее, чем на 0,2 нм.

<< | >>
Источник: Лавриненко Игорь Андреевич. РАЗРЕШЕНИЕ, ИДЕНТИФИКАЦИЯ И АНАЛИЗ ПЕРЕКРЫВАЮЩИХСЯ ПОЛОС ПОГЛОЩЕНИЯ ХРОМОФОРОВ НЕКОТОРЫХ ПРОСТЫХ И СЛОЖНЫХ БЕЛКОВ В ДИАПАЗОНЕ ДЛИН ВОЛН 240-320 НМ. 2015

Еще по теме 2.2.5 Регистрация спектров поглощения: спектрофотометры и протокол измерения:

  1. 1.1 Структура, некоторые физико-химические и спектральные свойства простых белков и апобелковой составляющей сложных белков
  2. 2.2.4.1 Получение растворов дезоксигемоглобина
  3. 2.2.5 Регистрация спектров поглощения: спектрофотометры и протокол измерения
  4. 2.2.5 Подходы, направленные на снижение фотометрических ошибок и увеличение разрешения в спектрах поглощения
  5. 2.2.5 Коррекция молярных спектров поглощения производных гемоглобина на присутствие неосновных компонент
  6. 2.2.11.1 Коррекция молярных спектров поглощения метгемоглобина Д
  7. 2.2.11.1 Коррекция молярных спектров поглощения дезоксигемоглобина A
  8. 2.2.11.1 Коррекция молярных спектров поглощения карбоксигемоглобина А
  9. 2.2.11.1 Коррекция молярных спектров поглощения оксигемоглобина A
  10. 2.2.11.1 Коррекция молярных спектров поглощения оксигемоглобина F
  11. 2.2.5 Усреднение молярных показателей поглощения в спектрах производных гемоглобина
  12. 3.1 Разрешение полос поглощения в спектрах белков с помощью второй производной
  13. 3.2 Соотнесение полос поглощения в спектрах белков к полосам поглощения в спектрах аддитивных моделей
  14. 3.3 Идентификация полос поглощения в спектрах белков путем их сопоставления в системе «аддитивная модель апобелка-свободные аминокислоты»
  15. Глава 4. РАЗЛОЖЕНИЕ УФ-СПЕКТРОВ ПОГЛОЩЕНИЯ ХРОМОПРОТЕИДОВ НА СПЕКТРЫ СВЕТОПОГЛОЩЕНИЯ ПРОСТЕТИЧЕСКИХ ГРУПП И АПОБЕЛКА С ПОМОЩЬЮ АДДИТИВНОЙ МОДЕЛИ
  16. 4.1 Разработка способа разложения УФ-спектров поглощения хромопротеидов на составляющие светопоглощения апобелковой и небелковой компонент