<<
>>

2.1 Объекты исследования

Объектами исследования являлись спектры поглощения фенилаланина, тирозина, триптофана, гистидина, цистеина, метионина и цистина; спектры поглощения некоторых простых и сложных белков.

Растворы ароматических, гетероциклических и серосодержащих L- аминокислот получены из кристаллических коммерческих препаратов (Ajinomoto, Япония и PanEco, Россия/Китай) с содержанием основного вещества более 98,5 %. Концентрация (моль/л) фенилаланина — (3,0А3,3)-10-3, тирозина — (3,3^-4,0)Э0-4, триптофана — (1,2^1,5)^10-4, гистидина — (8,Ш9,2)Э0-2, цистеина — (5,8^6,9)-10- , метионина — (0,Ш1,0)Э0 и цистина — (2,0^2,9)Э0 в 0,01 (аминокислоты PanEco) и 0,1 (аминокислоты Ajinomoto) моль/л Na-фосфатном буфере с pH 7,4 (PanEco и Sigma-Aldrich, США соответственно).

Максимальная концентрация используемых аминокислот лимитировалась, в первую очередь, их растворимостью, во вторую — молярным показателем поглощения в исследуемом диапазоне длин волн. Во избежание возможного окисления SH-групп цистеина применяли деаэрированный буфер в атмосфере гелия или азота.

Растворы белков были приготовлены как из кристаллических коммерческих препаратов: гемоглобин, каталаза, альбумин, трипсин (Sigma- Aldrich и РАА Laboratories, Австрия), так и выделены из цельной крови доноров (гемоглобин A, прибл. 99 %), кордовой крови рожениц (гемоглобин F, прибл. 80 %) в 0,01/0,1 моль/л Na-фосфатном буфере с pH 7,4 (PanEco/Sigma- Aldrich).

Концентрация белков в растворах варьировала в пределах от 3,0-10-6 до 4,0-10-5 моль/л. Для гемсодержащих белков (гемоглобин, каталаза) концентрация

рассчитана в пересчете на тетрамер.

С целью минимизации ошибки взвешивания, наименьшая навеска аминокислот и белков соответствовала значению не ниже 20 мг (Ohaus EP64, США). Их рабочие концентрации были приготовлены последовательным разбавлением исходного раствора (если это было необходимо).

Значения pH буферных растворов контролировали с помощью pH-метров Hanna 211 (Hanna, Германия) со стеклянным электродом HI 1332B и S20-K Seven Easy (Mettler Toledo, Швейцария) со стеклянным электродом InLabExpert Pro.

Коммерческие препараты аминокислот и белков в сухом виде хранили при температурных режимах, рекомендованных производителем. Их водные растворы хранили в холодильнике не более 24 ч при температуре +4 °C.

<< | >>
Источник: Лавриненко Игорь Андреевич. РАЗРЕШЕНИЕ, ИДЕНТИФИКАЦИЯ И АНАЛИЗ ПЕРЕКРЫВАЮЩИХСЯ ПОЛОС ПОГЛОЩЕНИЯ ХРОМОФОРОВ НЕКОТОРЫХ ПРОСТЫХ И СЛОЖНЫХ БЕЛКОВ В ДИАПАЗОНЕ ДЛИН ВОЛН 240-320 НМ. 2015

Еще по теме 2.1 Объекты исследования:

  1. Методы и формы познания эмпирического уровня: вычленение и исследование объекта
  2. 2.1Объекты исследований
  3. 2.1. Объекты исследования и организация работы
  4. О связи области диссертационного исследования и темы диссертации с практической деятельностью соискателя
  5. Взятие и направление трупного и иного материалана лабораторное исследование
  6. Судебно-медицинские исследования по отождествлению личности
  7. Т. Д. Гордон, М. Д. Раффенспергер ПОСТРОЕНИЕ ДЕРЕВА ЦЕЛЕЙ ДЛЯ ПЛАНИРОВАНИЯ ТЕОРЕТИЧЕСКИХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
  8. Исследование проблемы типологии почерка и поиск ее связи с типологическими свойствами личности
  9. Глава 3 ПОЧЕРК КАК ОБЪЕКТ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
  10. Предварительное исследование (подготовительный этап)
  11. Н. Я. Дараган ПРЕДМЕТ И МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ В «СТРУКТУРНОЙ АНТРОПОЛОГИИ» К. ЛЕВИ-СТРОССА
  12. ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОБЛЕМЫ БИОГЕОХИМИЧЕСКИХ ЦИКЛОВ НА ГЕОГРАФИЧЕСКОМ ФАКУЛЬТЕТЕ В МГУ М.А. Глазовская