<<
>>

2.3.2 Идентификация варианта (-17)G>C гена АВСА1

Условия проведения ПЦР описаны выше. Температура отжига праймеров -

60 °С.

В результате амплификации получался фрагмент размером 161 п.н.. ПЦР продукт обрабатывали 1 единицей активности рестриктазы (Fermentas, Литва) в буфере R (Fermentas, Литва).

Состав буфера: 10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 37°C); 10 mM MgCl2; 100 mM KCl; 0,1 mg/ml BSA при 37°С в течение ночи. Фрагменты ДНК подвергали электрофоретическому разделению в 6% ПААГ с последующей окраской бромистым этидием и визуализацией в ультрафиолете (Рисунок 9).

Рисунок 9. Идентификация варианта (-17)G>C гена АВСА1 c помощью ПЦР и рестрикционного анализа.


а. Фрагменты, образующиеся при инкубации продукта ПЦР с рестриктазой Rsa I: 1

- G(-17) ABCA1; 2 - C(-17) ABCA1

б. Электрофоретическая картина продуктов рестрикционного анализа: 1 - ПЦР продукт, 2 - маркер молекулярного веса рВК322/В8иЫ, 3 - гомозигота, CC(-17), 4

- гетерозигота CG(-17), 5 - гомозигота GG(-17)

<< | >>
Источник: Демина Екатерина Петровна. Экспрессия генов транскрипционных факторов LXRalpha, LXRbeta, PPARgamma и транспортера ABCA1 при атеросклерозе. 2014
Помощь с написанием учебных работ

Еще по теме 2.3.2 Идентификация варианта (-17)G>C гена АВСА1:

  1. Методы идентификации монетной титулатуры
  2. 8.2.5. Результаты идентификации.
  3. 1.5 Культурная идентификация
  4. Опыт идентификации и эндогенные опиаты
  5. Идентификация ценностных групп
  6. Экспертное исследование с целью идентификации личности
  7. РОЛЬ ШКОЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ В ПРОЦЕССЕ НАЦИОНАЛЬНОКУЛЬТУРНОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ Островская Т.В.
  8. Занятие 3.2 ИССЛЕДОВАНИЕ ИДЕНТИФИКАЦИИ ОДНОМЕРНЫХ И МНОГОМЕРНЫХ ЗРИТЕЛЬНЫХ СТИМУЛОВ
  9. Социальная идентификация и указание на виноватого через литанию
  10. Идентификация и реконструкция на основании изучения генетически детерминированных систем признаков
  11. Э. Д. Хафизов ПРАВОСЛАВИЕ КАК ФАКТОР ЭТНОКУЛЬТУРНОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ в российском ПОРЕВОЛЮЦИОННОМ ЗАРУБЕЖЬЕ
  12. Современные проблемы идентификации одаренных учеников в американской школе П. А. Тадеев (Киев, Украина)
  13. Лавриненко Игорь Андреевич. РАЗРЕШЕНИЕ, ИДЕНТИФИКАЦИЯ И АНАЛИЗ ПЕРЕКРЫВАЮЩИХСЯ ПОЛОС ПОГЛОЩЕНИЯ ХРОМОФОРОВ НЕКОТОРЫХ ПРОСТЫХ И СЛОЖНЫХ БЕЛКОВ В ДИАПАЗОНЕ ДЛИН ВОЛН 240-320 НМ, 2015